Устройство фазового контраста c кольцом DF (Микромед 3)

Метод фазового контраста используется для исследования малоконтрастных объектов, слабо различимых при наблюдении в проходящем свете по методу светлого поля. Метод позволяет исследовать неокрашенные малоконтрастные объекты, бесцветные прозрачные препараты и живые микроорганизмы, которые нельзя подвергать окраске. Метод используется в медицине для подсчета количества тромбоцитов при проведении клинического анализа крови, визуализации и подсчета эритроцитов в моче, в экологии для исследования живых организмов в воде.

Многофункциональное устройство состоит из конденсора Аббе с апертурной ирисовой диафрагмой и встроенной в общий корпус 5-ти позиционной турели с фазовыми диафрагмами. Турель может быть установлена в положения 10х, 20х, 40х / 100х, «DF» и «BF». Первые три соответствуют увеличениям фазовых объективов. Положение «DF» соответствует диафрагме темного поля, «BF» - свободному отверстие для работы традиционным методом светлого поля. В положении «BF» может регулироваться апертурная ирисовая диафрагма. Во всех других положениях турели апертурная диафрагма полностью открывается.

В комплекте четыре объектива позитивного фазового контраста - PLAN PH P 10х/0.25, PLAN PH P 20х/0.40, PLAN PH P 40х/0.65 и иммерсионный объектив PLAN PH P 100х/1.25. Все объективы имеют коррекцию на бесконечность и покровное стекло 0.17мм.

Суть метода заключается в следующем. При прохождении света через прозрачный малоконтрастный объект изменяется только фаза световой волны, и человеческий глаз это изменения визуализировать не может. Для получения контрастного и легко визуализируемого изображения, фазовый сдвиг нужно преобразовать в амплитудный. Это и происходит при наблюдении методом фазового контраста. Для этого на микроскоп устанавливается специальный конденсор с кольцевой диафрагмой и объектив с фазовой пластинкой внутри.

Свет от кольцевой диафрагмы конденсора проходит через исследуемый препарат и детали его структуры разделяют свет на преломленный и непреломленный. Прямой, непреломленный свет фазовая пластинка объектива пропускает, преломленный свет на пластинку не попадает. В формировании объективом изображения участвует только прошедший через пластинку свет. В результате наблюдается отчетливое, контрастное изображение.

Точная центрировка кольцевой диафрагмы и кольца фазовой пластинки объектива необходима для получения хорошо визуализируемого изображения. Эта процедура должна проводится очень точно, для этого кольцевые диафрагмы устройства расположены подвижно и могут перемещаться с помощью комплектных центрировочных винтов в двух направлениях. Для контроля точной настройки в комплект входит вспомогательный микроскоп СТ 2 с посадочным диаметром 30.0 мм, совместимым со всеми вариантами микроскопов Микромед 3. По дополнительному заказу можно приобрести вспомогательный микроскоп СТ с посадочным диаметром 23.2 мм. Это позволяет применять устройство со всеми вариантами микроскопов Микромед 2 с коррекцией на бесконечность.

Метод темного поля применяется при изучении живых биологических объектов, особенно объектов, которые не могут быть окрашены – микроорганизмов, тканевых культур и клеточных структур живых клеток. Метод используется и в других областях для исследования объектов, слабо поглощающих свет и поэтому плохо различимых при работе в светлом поле, например в материаловедении и ювелирной промышленности. При необходимости работы методом темного поля турель устройства устанавливается в положение «DF», апертурная диафрагма должна быть полностью открыта.

Требования к окулярной камере

Особенностью метода фазового контраста и темного поля является невысокая общая освещенность в пространстве предметов. Но при этом детали объекта, освещенные рассеянным средой препарата светом, могут иметь значительную яркость. Такой характер распределения света создает высокий диапазон яркостей, что вносит дополнительные требования к окулярной камере.

Поэтому при необходимости записывать и передавать изображения с высоким качеством на монитор, камера должна удовлетворять минимальным требованиям:

• Чувствительность должна не менее 1000 мВ/люкс-сек.
• Камера обеспечивать длительные выдержки не менее 1000 мс.
• Динамический диапазон камеры не менее 65 дБ.